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如何將講實驗室離心機訓練成幫手
發(fā)布時間：
2021-02-04
概要：
實驗室離心機用對了是“幫手”，用錯了就是“殺手”！
就拿植物dna提取來說，原理就是去掉植物細胞壁，細胞膜，質(zhì)體，線粒體，葉綠體然后剩下細胞核了，這就是我們需要的DNA。
通常采用機研磨的方法破碎植物的組織和細胞，由于植物細胞勻漿含有多種酶類(尤其是氧化酶類)對DNA的抽提產(chǎn)生不利的影響，在抽提緩沖液中需加入抗氧化劑或強還原劑(如巰基乙醇)以降低這些酶類的活性。在液氮中研磨，材料易于破碎，并減少研磨過程中各種酶類的作用。
十二烷基肌酸鈉、十六烷基三甲基溴化銨簡稱為CTAB、十二烷基硫酸鈉簡稱SDS，等離子型表面活性劑，能溶解細胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，從而使DNA得以游離出來。再加入苯酚和氯仿等有機溶劑，能使蛋白質(zhì)變性，并使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很強，經(jīng)離心機離心后即可從抽提液中除去細胞碎片和大部分蛋白質(zhì)。上清液中加入無水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，即得植物總DNA溶液。
雖然提取植物葉片的DNA比較簡單，用下離心機再根據(jù)植物,找段基因的序列設計引物，再順勢PCR一下了,看看個能把這段基因擴出來，整個過程其實需要用的到的設備并不多，重要的就離心機跟PCR儀器。
但是這里面需要注意的細節(jié)有很多，比如：
使用實驗室離心機的注意事項：
1. 離心機在預冷狀態(tài)時，離心機蓋必須關閉，離心結束后取出轉頭要倒置于實驗臺上，擦干腔內(nèi)余水，離心機蓋處于打開狀態(tài)。
2. 轉頭在預冷時轉頭蓋可擺放在離心機的平臺上，或擺放在實驗臺上，千萬不可不擰緊浮放在轉頭上，因為一旦誤啟動，轉頭蓋就會飛出，造成事故！
3. 轉頭蓋在擰緊后一定要用手指觸摸轉頭與轉蓋之間有無縫隙，如有縫隙要擰開重新擰緊，直至確認無縫隙方可啟動離心機。
4. 在離心過程中，操作人員不得離開離心機室，一旦發(fā)生異常情況操作人員不能關電源(POWER），要按STOP 。在預冷前要填寫好離心機使用記錄。
5. 不得使用偽劣的離心使管，不得用老化、變形、有裂紋的離心管。
6. 離心機套管底部要墊棉花或試管墊。
7. 電動離心機如有噪音或機身振動時，應立即切斷電源，即時排除故障。
8. 離心管必須對稱放入套管中，防止機身振動，若只有一支樣品管另外一支要用等質(zhì)量的水代替。
9. 啟動離心機時，應蓋上離心機頂蓋后，方可慢慢啟動。
10. 分離結束后，先關閉離心機，在離心機停止轉動后，方可打開離心機蓋，取出樣品，不可用外力強制其停止運動。
使用PCR儀器的注意事項：
(1)PCR儀使用的環(huán)境要恒定，工作環(huán)境的溫度不能過高或過低，最好在用空調(diào)的房間使用，有些PcR儀有溫度保護程序，在過低的溫度下機器不能啟動。
(2)電源要穩(wěn)定，工作的電壓不能波動過大，波動過大會造成電子器件損壞，一般建議將PcR儀電源接于穩(wěn)壓電源上。
但是要注意的是，不論是離心機還是PCR儀器，使用前都要詳細閱讀使用說明書，遇到不能解決的問題不要隨意拆卸機器，應該讓生產(chǎn)廠商負責售后服務的專業(yè)工程師進行處理。
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